Учебный файл

ОБЩИЕ ПРИНЦИПЫ ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ 1. Классифика ция лекарственных форм и особенности их а нализа Для фармацевтического анализа важное значение имеет агрегатное состоя ние ЛФ. От него зависят отбор пробы и подготовка ее к выполнению анализа. Л Ф по агрегатному состоянию классифицируют на твердые (порошки, таблетки , суппозитории, драже, гранулы и др.); жидкие (истинные и коллоидные раствор ы, суспензии, эмульсии, сиропы, капли, линименты и др.); мягкие (мази, гели, кре мы, капсулы и др.); газообразные (аэрозоли, газы). Лекарственные формы могут содержать одно , два, три и более ЛВ. Поэтому различают одно-, двух-, трех-, четырех- и т.д. компо нентные лекарственные смеси. Используют также термин «многокомпонентн ые лекарственные формы», если в них содержится несколько ЛВ. При оценке качества выполняют испытания на подлинность и количественное определение каждого из ЛВ, входящих в со став ЛФ. При выполнении испытания подлинности ЛФ , содержащихся в од но компонентных ЛФ, обычно используют те же химические реакции, что и для соответс твующих субстанций. Испытанию на чистоту подвергают, как правило, только растворы для инъекций. Устанавливают прозрачность и окра ску (цветность) раство ра, рН среды или щелочность (кислотность) растворов, а также допустимые пределы примесей тяжелых метилов. Наиболее потенциально опас ным путем поступления тяжелых металлов в организм человека являются различного рода инъекции. Поэтому необходимо устанавливать допустимые нормы содержания тяжелых металлов и вводить их ; ФС (ФСП) н а инъекционные ЛФ, в том числе плазмозамещ ающие растворы, средства для парентерального питания. Сложность в ыполнения количественного анализа зависит от числа компонентов, входя щих в состав ЛФ. Большинство применяемых в медицине жидких ЛФ содержит одно Л В. Но и в таких растворах возможно образование продуктов взаимодействия между ЛВ и растворителем, что нельзя не учитывать при выполнении анализа. Иног да жидкие ЛФ содержат, кроме ЛВ, различные стабилизаторы (сульфит, гидросульфит н атрия), антибактериальные добавки (бензойная кислота), т. е. представляют собо й растворы нескольких компонентов. При анализе таблеток, драже, гранул, линиме нтов, мазей, пилюль, капсул, включающих даже одно ЛВ, как правило, его предв арительно отделяют от основы или наполнителя. Анализ многокомпонентных лекарственны х форм. Характерная особенность анализа м ногокомпонентных ЛФ заключается в том, что способы опред еления индивидуальных вещ еств не дают положительных результатов при использовании их для анализ а смесей. Поэтому вначале необходимо выбрать условия, позволяющие анали зировать одно в присутствии другого, или предварительно отделить их дру г от друга и от вспомогательных веществ. При этом следует иметь в виду, что каждый из компонентов смеси характеризуется определенными физическими и химическими свойст вами. Они могут вызывать различные процессы взаимодействия (например, яв ления адсорбции, гидролиза и т.д.). Все это усложняет процесс количественн ого определения компонентов. Сложной операцией является разделение ин гредиентов, содержащихся в ЛФ, и выделение индивидуальных ЛВ. Для этого н еобходимы различные (нередко трудоемкие) методы экстракции и разделени я. Поэтому там, где это возможно, стремятся использовать методики, позвол яющие анализировать компоненты смеси при совместном присутствии. Если положительных результатов получить не удается, то необходима предварительная полная экстракция ЛВ с послед ующим его количественным определением. Таким образом, независимо от агрегатного состояния как однокомпонентные, так и многокомпонентные ЛФ имеют свои с пецифические особенности качественного и количественного анализа. Анализ готовых лекарственных форм (ГЛФ). Приготовленные на заводах медицинской п ромышленности ЛФ называют готовыми лекарственными формами (ГЛФ). Контро ль их качества осуществляют в соответствии с требованиями нормативной документации (ГФ, ФС, ФСП). Построение и изложение содержания ФС на ЛФ осуществляются в ст рогом соответствии с ОСТ 91500.05.001-00 «Стандарты качества лекарственных средст в». В заглавии ФС дается наименование ЛФ на ла тинском и русском языках. Разделы ФС даются в такой последовательности: состав; описание; растворимость; подлинность; прозрачность и цветность; предел кислотности, щелочности или рН; сухой остаток; содержание спирта; температура кипения; плотность; показатель преломления; угол вращения; в язкость; определение воды; тяжелые металлы; количественное определение; методы контроля; упаковка; маркировка; транспортирование; хранение; срок годности. Отдельные разделы могут совмещаться, а в случае необходимости могут вводиться другие разделы (испытание на токсичность, пирогенность , стерильность и т.д.). Большинство разделов ФС на ЛФ по своему об ъему и содержанию мало отличаются от соответствующих разделов ФС на ЛВ. Но есть и некоторые характерные особенности. Главная из них заключается в том, что подавляющее большинство ЛФ представляют собой многокомпонен тные системы. Они либо содержат два или несколько ЛВ, либо одно ЛВ в сочета нии с различными по химической структуре вспомогательными веществами. Перед приготовлением ЛФ все указанные компоненты подвергаются испытан иям в соответствии с требованиями НД. В процессе получения и хранения он и могут претерпевать различные физические и химические превращения ка к под влиянием внешних факторов, так и в результате взаимодействия друг с другом. Вот почему разрабатываются нормативные требования к качеству ЛФ, в том числе к ГЛФ. В ГФ приведены общие статьи на ЛФ. В них опи саны основные требования к качеству Л Ф, даны указания по проведению исп ытаний различных характеристик и параметров, указаны допустимые нормы отклонений массы, объема, размеров частиц и др. Здесь же указаны требован ия к упаковке, маркировке и хранению ЛФ. Впервые в ГФ XI включены требования к однор одности дозирования сухих ЛФ, имеющих массу 0 ,05 г и менее (таблетки, к апсулы). Это испытание позволяет установить однородность содержания ЛВ в одной таблетке (капсуле). Такие испытания необходимы, т.к. в процессе пол учения ЛФ фактическое его содержание в одной дозе может колебаться в зав исимости от соблюдения технологии, в том числе таких процессов, как пере мешивание, приготовление гранулятов, таблетирование и др. Особенно важе н контроль однородности дозирования в детских ЛФ. Методики этих испытан ий описаны в ГФ XI, вып. 2 (с. 136-162). Анализ гомеопатических лекарственных с редств. Трудности оценки качества гомеоп атических лекарственных средств обусловлены высокими разведениями. В результате чувствительность используемых в фармацевтическом анализе химических и даже физико-химических методов оказывается недостаточной для обнаружения и определения Л В, входящих в состав ряда гомеопатическ их средств. Если биологически активное вещество соде ржится в настойках, эссенциях, мазях, суппозиториях, опподельдоках в раз ведении до 2 С (2-сотенное, или 0,0001), то их анализ и стандартизация практически не отличаются от контроля качества ЛФ, используемых в аллопатической пр актике. ЛС в разведении 2-3 С (1(Н-10' 6 ) анализируют после проведения специальных приемов концентрирования с помощью упаривания, сжигания содержащихся в них ЛВ, с последующим определением одним из физико-химических методов исходя из его разрешающей способности. При более чем 3 С-разведении (10~ 6 ) достаточно установ ить подлинность Л В, содержащегося в одной разовой или суточной дозе. При очень высоких разведениях, до 50 С (1О 10 °), контроль качества гомеопатического средст ва существующими методами выполнить невозможно. Для таких ЛС контроль к ачества осуществляют на стадии получения, строго контролируя технолог ический процесс. Качество контролируют при закладке ингредиентов и фик сируют в акте загрузки. Каждый ингредиент подвергают предварительному анализу. Во всех перечисленных случаях для анализа и стандартизации гом еопатических ЛС используют хроматографические (ГЖХ, ВЭЖХ), фотометричес кие, флуоресцентные и другие методы. 2. Методы анализа однокомпонентных лекарственных форм Во всех фармакопеях мира важное место отведено анализу ЛФ. Около 30% частны х ФС содержат требования к качеству инъекционных растворов, таблеток, др аже, мазей, присыпок. Подавляющее большинство из них включает одно ЛВ. Сис тематизация сведений об испытаниях подлинности и количественном опред елении однокомпонентных ЛФ позволяет сделать заключение об общих прин ципах оценки их качества. Испытания на подлинность выполняют, как п равило, с помощью химических реакций, указанных в ФС на индивидуальные в ещества, входящие в состав жидких и сухих ЛФ. Некоторые ЛВ предварительн о извлекают из ЛФ органическими растворителями, а затем выполняют испыт ания. Иногда раствор жидкой ЛФ выпаривают досуха, а затем с остатком выпо лняют одно или несколько испытаний на подлинность. Растворы солей орган ических оснований, как правило, предварительно нейтрализуют щелочами, а затем основания извлекают органическими растворителями. Таблетки и драже перед испытанием на подл инность растирают в порошок, взбалтывают с водой или другим растворител ем (этанолом, эфиром, хлороформом, ацетоном, бензолом, раствором хлоровод ородной или уксусной кислоты, раствором аммиака или гидроксида натрия) и фильтруют. Затем с фильтратом выполняют испытания на подлинность, испол ьзуя реакции, рекомендуемые ГФ (ФС) для данного ЛФ. При плохой растворимос ти процесс экстракции выполняют при нагревании до определенной темпер атуры. Иногда реактив добавляют непосредственно к порошку растертых та блеток или извлекают ЛВ и выполняют испытания с остатком (после удаления органического экстрагента). Из мазей ЛВ предварительно экстрагируют эфиром, кислотой или другим растворителем. Для этого мазь обрабатывают р азведенной серной, хлороводородной или уксусной кислотой при перемеши вании и нагревании на водяной бане, затем охлаждают и фильтруют. Фильтра т испытывают с помощью химических реакций на соответствующие ионы или ф ункциональные группы. Масляные растворы перед выполнением испы таний растворяют в бензоле, петролейном эфире, хлороформе или ЛВ извлека ют смесью растворителей. Подлинность извлеченного ЛВ подтверждают либ о по температуре плавления (самого ЛВ или его производного), либо цветным и или осадочными реакциями, либо с помощью тонкослойной хроматографии. Для испытания подлинности таблеток ГФ (ФС) рекомендует использовать спектрофотометрию в ИК- или УФ-области. Из поро шка растертых таблеток или драже извлекают ЛВ (водой или другим раствори телем). Затем измеряют УФ-спектр и устанавливают наличие максимума свето поглощения при определенной длине волны или оптическую плотность в мак симуме светопоглощения либо рассчитывают значения отношений оптическ их плотностей при различных максимумах. Более объективна идентификаци я ЛВ путем сравнения с ИК-спектрами стандартных образцов. Количественный анализ однокомпонентных ЛФ выполняют в несколько этапов. Отбор пробы и взятие навески. При анализе твердых (таблетки, драже, гранулы) и жидки х (растворы, сиропы) ЛФ обычно руководствуются общими правилами отбора п роб. Вначале отбирается необходимое количество таблеток (драже) или жидк ости. Оно должно быть достаточным для того, чтобы результаты анализа был и точными для всей ЛФ. Затем после перемешивания или растирания отвешива ют навеску. Процесс растирания необходим для получения гомогенной масс ы, в которой ЛВ было бы равномерно распределено во всем объеме пробы. Не по двергают растиранию только таблетки, покрытые оболочкой, и драже. ЛВ в ни х распределено неравномерно, и колебания в массе отдельных таблеток буд ут значительно влиять на результаты определения. Количественный анали з таких лекарственных форм проводят из определенного числа таблеток (др аже). Подготовка лекарственной формы к анализу. На этом этапе проводят растворение (иногда с нагр еванием). Растворяют навеску в мерной колбе, доводят растворителем до ме тки и отбирают аликвотную часть для выполнения измерения. Выбор раствор ителя осуществляется с учетом растворимости ЛВ и других компонентов ЛФ, а также используемого метода количественного определения. Так, наприме р, при использовании кислотно-основного титрования в неводной среде орг анических оснований в качестве растворителя используют безводную уксу сную кислоту. Для растворения жидких ЛФ чаще всего применяют воду, а масл яных растворов - этиловый и метиловый спирты, бензол, петролейный эфир. Извлечение лекарственного вещества из л екарственной формы. Извлечение Л В осущес твляют для более правильной и точной оценки его содержания в ЛФ. Данный э тап является неизбежным, когда в ЛФ присутствуют ингредиенты, мешающие к оличественному определению ЛВ. Поэтому необходимо либо выделять индив идуальное Л В, либо отделять мешающие компоненты. Для разделения компоне нтов ЛФ используют различные способы: фильтрование, центрифугирование, экстракцию, а также экстракцию в сочетании с отгонкой. Наиболее часто дл я отделения ЛВ применяют фильтрование. К экстракционным методам можно о тнести извлечение ЛВ или продуктов его превращения (органического осно вания, комплекса или ионного ассоциата). Для разделения используют также экстракцию в сочетании с бумажной хроматографией или ТСХ. Создание условий, необходимых для выполн ения определения. После проведения преды дущих операций возможно определение ЛВ с помощью титриметрических или физико-химических методов. Однако чаще всего необходимо дополнитель ное создание специальных условий. Они диктуются прежде всего методом, с помощ ью которого проводят количествен ную оценк у Л В в данной ЛФ. Для комплексонометрии — эт о создание необходимого рН среды; для метода нейтрализа ции в не водных средах — добавление ацетата ртути (II) при определении галогеноводородных солей органиче ских осно вании: при использовании броматометрии или нитритометрии — добавление в реакционную смесь бромида калия и со знание клелой среды и т.д. Выполнение измерений по определению сод ержания лекарственного вещества. Количес твенный анализ может быть осу ществлен гравиметрическим, титриметрическими, физ ико-химическими и биологическими методами. Гравиметрический метод в анализе лекарст венных форм применяют редко, поскольку он весьма трудоемок и дли телен во времени. Титриметрические методы используют наиб олее часто для количественной оценки ЛВ в ЛФ. Возможность при менения титриметриче ских методов определяется следующими основными факторами: доступность ю способов установ ления точки эквивалентности; дозировкой Л В в ЛФ (при малых дозах из-за низкой чувствительности метода необходимы слишком большие навес ки); влиянием растворителей, наполнителей, стабилизаторов, консервантов и т.д. Эти ограниче ния послужили главной причиной того, что нередко для кол ичественного определения ЛВ в ЛФ используют не тот метод, который рекомендует Ф С для той же субстанции. Иногда титриметрические методы нецелесо образно применять из-за их низкой чувствительности. Так, для получения достаточно точных результатов (при условии расхода 20 мл 0,1 М раствора титранта) необхо димо брать на анализ очень большие количества ЛФ: около 500 мл раствора пла тифиллина гидротартрата для инъекций 0,2%; 670 мл раствора атропи на сульфата для инъек ций 0,1%; 1500 мл раствора скополамина гидробромида для инъекций 0,05%; 40 таблеток р езерпи на (по 0,1 мг). В этих случаях титриметрические методы заменены бол ее чувствительными физико-химическими методами определения ЛВ в ЛФ. Фотометрические (спектрофотометрия, фото колориметрия) методы чаще всего применяют для определения малых количе ств Л В в ЛФ. Наибольшее число методик приходится на долю ЛФ, содержащих та кие группы биологически актив ных веществ и их синтетических аналогов, как антибио тики, гормоны, витамины и др. Экстракционно-фотометрическим методом а нализируют ЛФ, содержащие ЛВ, представляющие собой орга нические основания и их соли. В качестве реактивов используют пикриновую кислоту, тропеолиио вые и другие красители, Образующиеся окрашенные продукты извлекают орг аническим растворителем (чаще всего хлороформом) и измеряют оптическую плотность полученного экстракта. Для количес твенной оценки содержания некоторых алкалоидов в растворах для инъекц ий используют турбидиметрю. для определения кордиамина и глюкозы в раст ворах, а также ЛФ, изготовленных в аптеке, — рефрактометрию. Биологические методы используют для коли чественной оценки в ЛФ некоторых сердечных гликозидов. Микробиологиче ски определяют активность ряда антибиотиков. 3. Методы анализа мно гокомпонентных лекарственных форм 3.1 Качественный а нализ Тр удности в идентификации многокомпонентных Л Ф состоят в том, что один ин гредиент может мешать обнаружению другог о или реактив одновременно реагирует с дв умя или несколькими компонентами смеси. Это происходит в случае от сутствия специ фических реакций на каждый из компонентов. Вместе с тем одни компоненты смеси могут способствовать открытию других. Поэтому в отличие от анализа однокомп онентных ЛФ возможны следующие варианты идентификации ЛВ при совместном присутствии. 1. Для идентифика ции подобраны специфические реакции (на ионы или функциональные группы ), при выполнении которых обнаружению одного компонента не мешает присутств ие другого. 2. Использован реактив , который п оследовательно реагирует вначале с одним комп онентом , затем с другим. Например , раствор формальдегида в концен трированной серной кислоте при обнаружении ко деина в смеси с кислотой ац етилсалицил овой вначале образует сине-фиолетовое (кодеин ), а затем красное окрашивание (кислота ацетилса лициловая ). 3. Реактив взаимодействует с обоими компонентами , но продукты взаимодействия лег ко можно разделить. Примером чожет служить анализ смеси натрия бензоата и натрия салицилата при возде йствии раствором сульфата меди в присутствии хлороформа . Хлороформный слой приобретает го лубое окрашивание (бензоат-ион ), водный — зелен ое (салицилат-ион ). 4. Один из компонентов ЛФ в присутствии реактива дает цветную реа кцию на другой компонент. Т ак можно обнаружить первичные ароматические а мины реакцией азосочетания , если в смеси п рисутствует резорцин (отпадает необходимость в добавлении р-нафтола ). 5. При добавлении реактивов вначале обнаруживают один компонент , а затем по следовательно открывают остальные . Примером может служить обнаружение бензокаина в сме си с натрия гидрокарбонатом и метамизолом-нат рия реакцией образования азокрасителя. После прибавления хлороводородной кислоты выделяются пузырьки газа (гидрокарбо нат-ион ) , при последующем добавлении раствор а нитрита натрия появляется быстро исчезающее сине-фиолетовое окрашивание (мета мизол-натрий ) и , наконец , от добавления щелочного раств ора р-нафтола смесь приобретает красный цвет (бензокаин ). 6. Обнаружить один компонент в присутствии других не представляется возможным без предва рительного их разделения. Для этой цели ис пользуют воду, растворы кислот или щелочей, органические растворители (этанол, эфир, хлороформ). Затем в полученных экстрактах идентифиц ируют каждый из компонентов. 7. Использование различных видов хроматографии (ВЭЖХ, ГЖХ, ТСХ) для разделения и идентификации компонентов твердых ЛФ. Наприме р, в ТСХ-анализе использование пластинок «Силуфол УФ-254». На них наносят ра створ или хлороформное извлечение из ЛФ и раствор стандартного образца. После хроматографирования пятна на хроматограмме проявляют с помощью цветных реакций или УФ-света. Такие методики применимы в анализе многоко мпонентных мазей и аэрозолей. 8. При анализе жидких многокомпонентных ЛФ присутстви е в них галеновых препаратов (настоек, экстрактов), а также настоев и отвар ов нередко мешает обнаружению других ингредиентов. Поэтому идентифика ции должна предшествовать экстракция или разделение компонентов с пом ощью бумажной, тонкослойной или других видов хроматографии. 3. 2 Количественный анализ Применение титриметрических методов основано на особенностях физичес ких и химических свойств ингредиентов, входящих в состав ЛФ, причем чем больш е сходства в этих свойствах, тем труднее с достаточной точностью осущест вить определение каждого из компонентов. При анализе ЛФ, содержащих три ингредиента и более, редко удается найти единый метод, позволяющий опред елить все компоненты. Поэтому используют сочетание нескольких методов, основываясь на особенностях таких физических и химических свойств инг редиентов, как растворимость, кислотно-основные, окислительно-восстано вительные свойства, возможность взаимодействия с различными титрантам и и реактивами. Количественный химический анализ лекарс твенных веществ в многокомпонентных смесях может быть выполнен без раз деления компонентов смеси или после предварительного разделения смеси на отдельные компоненты. 3.2.1 Количественный анализ без разделения ко мпонентов смеси Титриметрический анализ лекарственной с меси, включающей два ингредиента и более, можно выполнить без разделения компонентов. Для этого подбирают условия, при которых определение одног о компонента не мешает определению других. При этом используют титримет рические методы, основанные на различии свойств веществ, содержащихся в смеси (кислотно-основных свойств, констант комплексообразования, произ ведений растворимости и др.). Чаще всего применяют методы, основанные н а одновременном титровании суммы двух компонентов. Затем количественн о определяют содержание одного из этих компонентов, используя методы, ос нованные на свойствах, присущих только данному веществу. Расчет произво дят по разности между количеством миллилитров титрантов (одинаковой мо лярности), затраченных на первое и второе титрование. Так, при наличии в смеси солей органических о снований (гидрохлоридов, гидробромидов, г идройодидов) и галогенидов (хлориды натри я, калил) титруют вначале аргентометрически сумму гидрогалогенидов и галоге нидов (индикатор бромфеноловый синий), а затем методом нейтрализации определяют связанную кислоту (индик атор фенолфталеин). Содержание галогенид а устанавливают по разности. Один из компонентов может быть определен окислительно-восстановительным методом при отсутс твии в смеси других окисляющихся компоне нтов. Производные фенолов (резорцин) опред еляют в сме сях броматометрическим методом. Если в см еси содержится легкоокисляющееся вещест во, то фенол вначале экстрагируют эфиром. Первичные ароматические амины (производн ые л-аминобензойной кислоты, сульфаниламиды) в отсутствие других окисля ющихся компонентов избирательно определяют методом нитритометрии. Эти м же методом после предварительного гидрирования можно определять нит ропроизводные (левомицетин), а после гидролиза — ацетиламинопроизводн ые (парацетамол). Комплексонометрию используют тогда, когд а один из компонентов смеси представляет собой соль кальция, магния, цин ка, ртути или других тяжелых металлов. Если предварительно другим методо м была оттитрована смесь солей с одинаковыми анионами, то установленное комплексонометрически количество одной из солей затем вычитают из сум мы компонентов. Кислотно-основное титрование смесей осно вано на различии констант диссоциации компонентов. Поэтому данный мето д используют при наличии в смеси нескольких компонентов с кислотно-осно вными свойствами. Дифференцированное титрование смесей кислот, основа ний или их солей возможно, если константы диссоциации компонентов смеси различаются не менее чем в 1000 раз. Ступенчатое кислотно-основное титрование, основанное на послед овательном определении компонентов смеси в од ной пробе с использов анием различных индикаторов, применяют при определении компонентов ЛФ, содержащих карболовые кислоты и их соли в сочетании с барбитуратами или органическими основаниями, аминокислоты в смеси с кисло той аскорбиновой, ник отиновой и др. При наличии в смеси только одного ЛВ, прояв ляющего кислотные или основные свойства, титрование осуществляют соот ветственно алкалиметрическим или ацидиметрическим методом. Выбор инди катора зависит от константы диссоциации. Для титрования хлороводородн ой кислоты используют метиловый красный, аминокапроновой — фенолфтал еин, глутаминовой — бромтимоловый синий и т.д. Варьирование индикаторам и возможно также в следующих случаях. 1. Если смесь со держит два компонента, значительно различающихся по основности, то испо льзуют два разных индикатора и последовательно титруют вначале один, а з атем второй ингредиент. Можно подобрать условия определения сме сей кислот или осн ований, рН растворов которых отличаются друг от друга. При титровании см еси кислот или оснований с различными константами диссоциации вначале титрую тся более сильные кислоты (основания), затем — более слабые. 2. Если один из компонентов смеси представляет собой к ислоту, а другой — соль или основание, то в одной навеске вначале титруют кислоту, а затем — сумму образовавшейся соли или основания. Расчет выпо лняют по разности количеств затраченных титрованных растворов кислоты и щелочи. 3. При анализе смеси ЛВ, одно из которых нерастворимо ил и мало растворимо в воде, используют несмешивающиеся или смешанные раст ворители (воду и спирт). Подбирая соответствующие растворители и индикат оры, можно последовательно оттитровать два ЛВ, проявляющие кислотные ил и основные свойства, но имеющие различные константы диссоциации. 4. Методом неводного титрования можно количественно о пределять без разделения двухкомпонентные ЛФ. Для этого используют два способа. Один из них заключается в титровании каждого ингредиента в том растворителе, в котором проявляются только его кислотные или основные с войства. Так можно определять смеси кислоты и основания, кислоты и соли, о снования и соли. Второй способ основан на дифференцированном титровани и в одном растворителе обоих ЛВ, имеющих разные константы ионизации. Эти м способом титруют смеси оснований с солями и смесь оснований. При титро вании в среде ледяной уксусной кислоты можно без разделения последоват ельно определять смесь более сильного и более слабого органического ос нования. 5. Последовательное титрование одной навески ЛФ внача ле в водной, а затем в неводной среде может быть применено, когда в состав бинарной ЛФ входят слабые основания (пуриновые алкалоиды) и алкалоиды с более сильными основными свойствами. Если ЛФ включает пуриновые алкало иды и вещества слабокислого характера (барбитураты), то последние опреде ляют алкалиметрическим методом после предварительного извлечения эфи ром. Пуриновые алкалоиды в той же навеске определяют в неводной среде ме тодом неводного титрования. 3.2.2 Количественный анализ смесей после пред варительного разделения компонентов Разделение смеси с помощью экстракции осн овано на различии растворимости компонентов в воде и в органических рас творителях или на различии кислотно-основных свойств. По этому принципу Л В могут быть распределены на группы. Неорганические вещества, как правило, нер астворимы в органических растворителях. Оксиды металлов нерастворимы в воде, но растворимы в кислотах. Соли большинства неорганических кислот и щелочных, щелочно-земельных и тяжелых металлов (за исключением сульфа тов кальция и бария) хорошо растворимы в воде. Органические кислоты алифатического ряд а, оксикислоты, аминокислоты, как правило, растворимы в воде. Ароматическ ие кислоты (бензойная, салициловая, ацетилсалициловая) практически нера створимы (мало растворимы) в воде и растворимы в органических растворителях. Соли органических кислот (лимонной, уксус ной, молочной, глюконовой, бензойной, салициловой), натриевые соли барбит уратов, сульфаниламидов растворимы в воде и нерастворимы в таких органи ческих растворителях, как хлороформ, эфир. Все органические основания обычно раство римы в органических растворителях. Однако они мало растворимы или практ ически нерастворимы в воде. Большинство органических оснований и алкал оидов растворимы в растворах кислот (с образованием солей). Соли органических оснований хорошо раств оримы в воде, этаноле и, как правило, нерастворимы в таких органических ра створителях, как эфир, хлороформ. Некоторые из солей органических основа ний, в том числе алкалоидов (кокаи на гидрохлорид, папаверина гидрохлорид), растворим ы и в воде, и в хлороформе. Фенолы растворимы в щелочах с образовани ем фенолятов (феноксидов). Простые одноатомные и двухатомные фено лы легко растворим ы в воде. Фенолы более сложной химической структуры, как правило, в воде не растворимы. Некоторые азотсодержащие соединения (сульфаниламиды, алки луреиды сульфокислот, циклические уреиды) растворимы в щелочах с образо ванием натриевых солей. Органические вещества, не образующие сол ей с кислотами и щелочами (производные сложных эфиров, уретаны, ацикличе ские уреиды, ацетаминопроизводные, терпены), обычно нерастворимы (трудно растворимы) в воде и растворимы в органических растворителях. Имеются группы органических ЛВ, которые о чень мало растворимы и в воде, и в органических растворителях (произ водные нитрофу рана, 4-оксикумарина, урацила). Различаются по растворимости природные б иологически активные вещества. Препараты сердечных гликозидов мало ра створимы или практически нерастворимы в воде и в эфире. Практически нера створимы в воде препараты стероидных гормонов. Большинство из них раств оримо в растительных маслах и в этаноле. Витамины по растворимости разде ляются на две группы: водорастворимые и жирорастворимые. Антибиотики (ле вомицетин, феноксиметилпенициллин, гризеофульвин, эритромицин) мало ра створимы или практически нерастворимы в воде. Натриевые и калиевые соли антибиотиков, а также их соли с хлороводородной, серной кислотой, как пра вило, хорошо растворимы в воде, но нерастворимы (мало растворимы) в органи ческих растворителях. Используя указанное различие в растворим ости ЛВ, можно осуществить разделение компонентов Л Ф следующими метода ми. 1. При наличии в смеси Л В, хорошо растворимых в воде и практически в ней нерастворимых, ра зделение осуществляют обработкой смеси водой с последующим фильтрован ием. На фильтре остаются нерастворимые в воде вещества. Так можно отделя ть от других ингредиентов растворимые в воде неорганические соли, соли о рганических кислот, соли азотсодержащих органических оснований. 2. ЛВ, растворимые в органических растворителях, не сме шивающихся с водой (хлороформ, эфир), можно отделять от ЛВ, нерастворимых в этих растворителях. Разделение выполняют путем экстракции хлороформо м или эфиром. Так можно отделять ароматические кислоты и органические ос нования от солей неорганических и органических кислот, а также от солей органических оснований. 3. ЛВ, растворимые в органических растворителях, можно отделять от некоторых алифатических кислот и производных фенолов. Посл едние необходимо предварительно действием щелочей превратить в водора створимые феноксиды (феноляты). Затем растворителем, не смешивающимся с водой (хлороформом или эфиром), извлекают ЛВ, растворимые в этих раствори телях. 4. Для отделения ЛВ, растворимых в хлороформе или эфире , от органических оснований последние предварительно нейтрализуют кис лотами. Полученные соли оснований остаются в водном растворе. 5. Соли органических оснований можно предварительно п ревратить в основания путем нейтрализации связанных кислот щелочами. О бразующиеся органические основания затем экстрагируют хлороформом ил и эфиром. Ес ли, пользуясь описанными методами, удается количественно разделить ком поненты смеси, то каждый из них затем определяют тем или иным титриметри ческим методом. При разделении смесей, содержащих три компонента и более , нередко получаются двухкомпонентные экстракты веществ с одинаковой р астворимостью. Их анализируют методами осаждения или кислотно-основно го титрования, последовательно определяя каждый из компонентов. Следует учитывать, что ЛВ, мало растворимы е в воде или в органическом растворителе, частично извлекаются вместе с отделяемым компонентом. Это нередко не дает возможности выполнить коли чественное разделение смеси. Необходимо также обращать внимание на отс утствие примеси воды в органическом растворителе. Разделение сухих ЛФ т аким растворителем приводит к частичной экстракции ЛВ, растворимых в во де. После извлечения ЛВ органическим раствор ителем последний обычно вначале удаляют, а затем проводят титрование. Ор ганические основания, в т.ч. основания алкалоидов, извлекают из смесей хл ороформом. Растворитель отгоняют, остаток растворяют в воде или в этанол е и титруют хлороводородной кислотой, используя индикатор, соответству ющий константе диссоциации основания. Количественное определение методом нейт рализации некоторых смесей, содержащих соли органических кислот и соли органических оснований, выполняют в присутствии органических раствори телей (хлороформа, эфира). Последние извлекают выделяющуюся органическу ю кислоту или органическое основание в процессе титрования. Извлечение необходимо, так как, проявляя кислотные или основные свойства, они могут повлиять на результаты титрования. Если в смеси содержатся гидрохлорид орга нического основания и неорганическая кислота, то вначале титруют сумму кислот (связанной и свободной). Затем отдельно титруют хлороводородную к ислоту, связанную с органическим основанием, аргентометрическим метод ом по хлорид-иону. Содержание рассчитывают по разности израсходованных титрованных растворов гидроксида натрия и нитрата серебра одинаковой молярной концентрации. 4. Физико-химические методы анализа многокомпон ентных лекарственных форм 4.1 Количественный анализ смесей без предварительного разделения компо нентов Физико-химические методы даю т возможность выполнения анализа двух - и д аже трехкомпонентных смесей без предварительного разделения с достаточной для фа рмацев тического анализа точностью. Из электрохимических методов для количес твенного определения многокомпонентных лекарственных форм использую т полярографию и потенциометрию. Полярографическим методом можно, напр имер, анализировать витамины (тиамин, рибофлавин, пиридоксин, кислоту ас корбиновую) в смесях. Метод неводного титрования в сочетании с потенциом етрией позволяет в одной навеске без разделения последовательно опред елять содержание нескольких компонентов. Это обусловлено улучшением у словий кислотно-основного титрования за счет объективного установлени я точки эквивалентности с помощью индикаторного и стандартного электр одов. Фотоколориметрическим методом при подбо ре соответствующих цветных реакций определяют, как правило, содержание одного из ЛВ в многокомпонентных ЛФ. Так, на основе фенолгипохлоритной р еакции можно установить содержание кофеина в смеси. Определению кофеин а не мешают около 20 других Л В. Для количественной оценки парацетамола в с месях с метамизолом-натрия, кофеином, салицилатами используют методику, основанную на гидролизе и последующем диазотировании и азосочетании. Спектрофотоме трический метод определения без предварительного разделения компонентов основан на аддитивнос ти значений оптической плотности всех компоне нтов смеси при одной длине волны . Спе ктрофотометрическое определение двух (и более ) компонентных ЛФ может быть осуществлено разл ичными способами. 1. ЛФ сод ержит два ЛВ , одно из которых имеет ма ксимум светопоглощения , а другое не поглощает УФ-свет в данной области . Спектрофотометр ический анализ выполняют как при анали зе однокомпонентной ЛФ. 2. Каждый из двух компонентов см еси имеет свой максимум светопоглощения , в котором второй компонент оптически прозрачен . Последовательно анализируют одно , а затем в торое ЛВ в соответствующем максим уме с ветопоглощения. 3. ЛФ включает два ЛВ , причем в максимуме поглощения одного из них и меет некоторое светопоглощение и второе вещес тво , а в максимуме поглощения второго веще ства первое оптически прозрачно . Такие смеси анализируют методом изолированной абсо рб ции . ЛВ , в максимуме которого другой компо нент не поглощает , определяют как в одноко мпонентной ЛФ . Метод изолированной абсорбции используют , например , для анализа ацетилсалицилово й кислоты в присутствии салициловой. 4. Если двухкомпонентая ЛФ содержит ЛВ , п олосы поглощения которых налагаю тся друг на друга , то для количественного определения может быть использован расчетный метод Фирордта . Метод приемлем , если при двух длинах волн наблюдается значительное различие в интенсивности поглощения обоих компонентов. Предварительно с помощью станда ртных образцов устанавливают значения удельных показателей поглощения обоих компонентов при каждой выбранной для анализа длине волны . Затем для определения каждого компонента у станавливают оптическую плотность анализируемог о раствора смеси при обеих длинах волн . Точность зависит от того , насколько велико различие между светопоглоще нием компонентов смеси . Она будет наибольшей , ког да одна длина волны является максимумом с ветопоглощения одного ЛВ и минимумом для второго , а при второй длине волны буд ет наблюдаться обратное явление. 5. Количественное определение сухих двухкомпонентных ЛФ можно выполнять без предв арительного разделения и без вычисления удель ных показателей поглощения компонентов . Сущность метода заключается в том , чт о гото вят растворы каждого из компонентов , содержащ ихся в ЛФ , той же концентрации , что и общая концентрация раствора смеси Сем . Затем при избранной аналитической длине волны измеряют оптическую плотность раствора ЛФ относительн о раствора одного из компонен тов (А\ ), а потом оптическую плотность второго компонент а относительно раствора ЛФ (Лг ). 6. Широкие возможности в анализе многокомпонентных смесей открывает использование различных методов дифференциальной фотометрии . При дифференциальном фотометрическом анал и зе смесей , содержащих два компонента , измеряют оптические плотности анализируемого раствора при двух длинах волн . Измерения выполняют относительно растворов сравнения , содержащих ст андартные образцы анализируемых ЛВ . Другой ва риант метода основан на испо л ьзова нии двух растворов сравнения . Однако каждый из них включает один из компонентов то й же концентрации , в которой он содержится в смеси . Поэтому при расчете содержания одного компонента концентрация второго вычит ается . Это позволяет добиться высокой точ н ости анализа . Можно достигнуть пол ожительных результатов , используя один и тот же раствор сравнения , состав которого бли зок к составу анализируемой смеси. 7. Значительно упрощает выполнение а нализа ЛФ применение Д Ј- спектрофотометрического метода . Он может быт ь использован в количественном анализе как однокомпонентных ЛФ , так и многокомпонентных смесей . Обязательн ое условие выполнения анализа — неизменяемос ть УФ-спектра поглощения компонентов смеси , но изменение его у анализируемого ЛВ , происх одящее под действ и ем кислот , щелоче й , окислителей , УФ-облучения и др . Использование Д-Е-дифференциального метода исключает влияние светопоглощающих наполнителей , содержащихся в г отовых ЛФ. 8. Перспективным является метод прои зводной спектрофотометрии , или метод ортогональны х ф ункций . Он приемлем для определения одного вещества в присутствии другого , ес ли их спектральные кривые аппроксимируются по линомами разных степеней . Наиболее простым ва риантом использования ортогональных функций явля ется определение вещества на фоне линейн о го поглощения примеси , наполнителей или основы ЛФ . Производная спектрофотометрии дает возможность выполнять определение ЛВ в многокомпонентных смесях. 4.2 Количественный анализ смесей после пред варительного разделения компонентов Разделение компонентов смеси основано на различии их раствори мости . ЛФ , содержащие более двух светопоглощаю щих веществ , как правило , предварительно разде ляют на отдельные фракции , применяя различные экстрагенты (эфир , хлороформ , растворы кислот , щелочей и др .). Если фракция сод е ржит одно ЛВ , его определяют спектрофо тометрическим методом . При наличии в экстракт е двух ингредиентов пользуются методом изолир ованной адсорбции , методом Фирорд та и др . Наряду со спектрофотометрией после разделения могут быть использованы другие фотометри ческие методы. Метод экстракционной фотометрии позволяет выделять Л В из смеси с последующим его определением . Боль шие возможности создает использование этого метода в анализе органических оснований и их солей , в т.ч . алкалоидов . Наиболее часто применяемые реагенты — метиловый оранж евый и другие красители . С помощью экстрак ционной фото метрии удалось определить два близких по свойствам вещества : эфедрин и димедрол , а также другие смеси. Тонкослойная хроматография (ТСХ) особенно широко используется в анализе Л Ф, содержащих практически во группы ЛВ. Р азделение с помощью ТСХ сочетают с количественным определением непоср едственно на хроматограммаили после элюирования ЛВ, используя для этой цели различные методы. 1. Рас твор ЛФ хроматографируют, проявляют хроматограмму и производят сравни тельную оценку площади пятен анализируемого ЛВ и стандартного образца. Измерения выполняют планиметрически, рассчитывая площадь пятна по рад и усам его зон. 2. Сочетают разделение с помощью ТСХ и спектрофотомет рическое определение непосредственно на хроматограммах. Способ примен яют для анализа смесей алкалоидов, сульфаниламидов, стероидных гормоно в. Точность его сравнительно мала. 3. Измеряют интенсивность окраски пятна на хроматогра мме, пользуясь денситометрическим методом, а также методами, основанным и на измерении интенсивности отражения или флуоресценции. Способ приме ним для анализа витаминов, гликозидов. 4. Элюируют Л В из соответствующих зон тонкослойной хр оматограммы стандартного образца и ЛФ. Затем в каждом из элюатов устанав ливают концентрацию Л В, применяя для этого оптические методы, полярогра фию и др. Но чаще все го анализ Л В в элюатах осуществляют методами УФ-спек трофотометрии или фотоколориметрии. Га зожидкостная хроматография (ГЖХ). В отличие от ТСХ и иных видов хроматогр афии в ГЖХ не требуется сочетание с другими методами для количественной оценки состава анализируемой смеси. С помощью ГЖХ можно разделить и уста новить подлинность и выполнить количественное определение ЛФ, содержа щих до 8-10 компонентов. Высокоэффективную жидкостную хроматогр афию используют для разделения и количественного определения близких по химической структуре веществ производных фенотиазина, сульфанилами дов, антибиотиков тетрациклинового ряда. Метод приемлем, например, для о пределения трехкомпонентных смесей алкалоидов. ВЭЖХ оказалась эффекти вной и при анализе современных мультивитаминных ЛС, содержащих до 13 вита минов и 18 микроэлементов в одной ЛФ. Трудности анализа обусловлены малым содержанием этих веществ (от нескольких микрограммов до сотен миллигра ммов). Для количественного определения многоко мпонентных смесей иногда сочетают титриметрические и физико-химически е методы. Такой способ весьма эффективен при анализе трех (и более) компон ентов в смеси. Чаще применяют сочетание титриметрических методов с фото метрическими, например, при анализе смеси эфедрина и папаверина гидрохл оридов и натрия бензоата используют фотометрический метод для определ ения эфедрина, остальные компоненты титруют в неводной среде. Многокомпонентные ЛФ можно также определ ять, сочетая титриметрические методы в водной и неводной средах со спект рофотометрией. Исключить процесс разделения ингредиентов двух - и трехкомпонентных см есей можно сочетанием дифференцированного потенциометрического и фот ометрического титрования в среде неводных растворителей с использован ием нескольких индикаторов.

Приложенные файлы


Добавить комментарий